这种降解菌可以固定化 成 2~3mm颗粒,SBR处置系统中连续培养 1周。具有稳定的属性并且可以处置 200~2000mg/L苯酚。相应的VSS中的降酚速 率是993.6和 519.3mg/d同时单一的菌株也可以在1500mg/L苯酚浓度下生存,通过共聚焦激光扫描 显微镜测试显示,醋酸钙不动杆菌主要存活在距外 外表 200~250μm以下,并有胞外聚合物覆盖以抵抗 苯酚的毒性,对聚集进行的分析测试标明有可能是分泌蛋白的作用。[7]
苯酚降解基因的研究现状
位于大质粒上或染色体上。好氧菌中,苯酚的降解基因通常成簇排列。苯酚羟化酶基因是降解苯 酚的关键基因,编码苯酚降解途径的第一个酶,负责 将苯酚转化为邻苯二酚;将邻苯二酚开环裂解为三 羧酸(TCA 产物,由邻位和间位酶负责的邻苯二 酚的进一步降解具有不同的途径和酶系统:邻苯二 酚 23-双加氧酶 C23O间位裂解)或邻苯二酚 12-双加氧酶 CatA 邻位裂解)
具有很高 耐酚性和高效的降酚性能。由 puriW酶通 过硫酸铵沉淀,葡聚糖 G-75凝胶 Wltration和 HiTrapQ琼脂糖凝胶柱层析得到最佳生存温度和 pH值分 别是25°C和 8.0这类双加氧酶 C23OCatA 分别由 C23O和 CatA 等双加氧酶基 因编码,不同的降解菌中具有高度的同源性。从红色念珠菌 TL3中提取出邻苯二酚 12-双加氧酶。
邻苯二酚 12-双加氧 酶的多肽测序片段和 MA LDI-TOF/TOF总量测定为 BLA ST分析提供了氨基酸序列信息,对底物分析显示 puriW酶是邻 苯二酚 12-双加氧酶的一种。BLA ST分析结 果显示邻苯二酚 12-双加氧酶与从念珠菌中得到CaO19_12036蛋白质具有高度的同源性。
用加入苯 酚的合成污水喂养首批顺式流化床,运用功能 性基因分析技术定量评价生物反应器中的苯酚羟 化酶多样性。首先对实验室规模的活性污泥中的细 菌进行苯酚降解遗传多样性的定量分析。得到活性 污泥中提取 DNA 基因组,用于主要亚基苯酚羟化 酶(LmPH基因的激进扩增,并发生克隆库。经过系 统发育分析和9个月的实时 PCR分析,LmPH基因 拷贝总数基本上仍然稳定,但是修订的苯酚污泥 中,苯酚降解显著变化的同时 LmPH基因多样性也 50环境维护与循环经济 增加,这标明活性污泥中苯酚降解效率取决于所 结合的一些多余物种的活性。
其中一个是NtrC家族中常见的积 极参与调节其他苯酚羟化酶,2001年分离出睾丸酮丛毛单胞 降酚菌 R5进一步研究 R5降解途径的苯酚羟化酶基因(Phc发现与其他苯 酚羟化酶基因具有不同的转录调控机制。3个调节 蛋白参与了转录。另一个抑制 Phc错 乱表达,还有一个对 Phc进行扩增表达。
同时也标明降解酶的表达模式也将是多样化的并可能影响分解行为。从受苯酚污染的水体里分 离出苯酚和甲酚降解假单胞菌,这个细致的机制使得降酚菌 R5表示出了相对高的苯酚充氧活 性。通过苯酚羟化酶 LmPH和邻苯二酚 23-双加氧酶的序列分析,同 时依据质粒传染 pheBA 子编码的邻苯二酚 12-双 加氧酶和单组分苯酚羟化酶的结构,标明物种的菌株和遗传因子的系统分组菌株之间比较 catA 基 因序列,由 B遗传因子得到P.Xuorescen菌株 中 LmPH和 C23O相似,而在P.mendocina菌株中 遗传异质性却很明显,由遗传因子 C和 F得到P.Xuorescen菌株含有 pheBA 遗传支配子,由遗传 因子 B得到P.putida菌株是通过 ortho途径降解 苯酚的大多数的这种菌株也检测到这种支配子,遗 传多样性的代谢基因结合的结果标明几乎没有酚醛 化合物降解的中间路线。
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